1、上海安亭科學儀器廠介紹本次實驗需要的材料與儀器
豬CS111014-01( Mw=17.5kDa,華懋雙匯實業( 集團) 有限公司生物化學制藥廠) ;低分子量豬( Mw=4.1kDa,自制) ;Dox.HCl( 97% ,北京偶合試劑有限公司) ,CS-Dox( 自制) ,乙二胺四乙酸二鈉( 分析純,國藥試劑有限公司) 。其他試劑均為國產分析純。
實驗儀器:上海安亭科學儀器廠TDL-40B臺式低速離心機,Cary Eclipse熒光分光光度計( 美國Varian公司) ,TF-FD-1冷凍干燥機( 上海田楓實業有限公司) ,VortexQL-902渦旋儀( 江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司) 。
實驗動物:SD 大鼠( 雄性,200 ± 20 g) ,購買于濟南朋悅實驗動物繁育有限公司。
2 、上海安亭離心機分析大鼠血漿的實驗方法
檢測條件的選擇:選用熒光分光光度法測量血漿中Dox的含量。 Ex480nm,Em500-800nm掃描,可以得到在Em593nm處有較高峰,故本實驗檢測條件選用Ex480nm,Em593nm,激發與發射狹縫均設定為10nm。
空白血漿樣品的采集:實驗前SD大鼠禁食不禁水12h,實驗大鼠乙醚麻醉,眼內眥取血,采集的空白血液標本放入到上海安亭科學儀器廠裝有EDTA二鈉的離心管中,置于上海安亭TDL-40B臺式低速離心機中以3000r/min離心10min,取上清,即得空白血漿樣品。
Dox溶液的配制:精密稱取 Dox·HCl 1.25mg加水定容到25ml的容量瓶中,配制50μg/ml的Dox溶液作為儲備液。精密吸取儲備液( 0.04ml、0.10ml、0.20ml、 0.40ml、1.00ml、2.00 ml、4.00 ml、6.00ml) 放入10ml容量瓶中加水定容,配制相應濃度( 0.2μg /ml、 0.5μg/ml、1、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml) 的Dox溶液,4℃避光保存待用。
Dox標準曲線的繪制:精密吸取8份大鼠空白血漿 200μl放入上海安亭科學儀器廠生產的離心機需用的1.5ml離心管中,每個離心管中分別加入不同濃度的鹽Dox溶液200μl,渦旋混勻,使得血漿中Dox的濃度分別為0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.50μg /ml、1.00μg /ml。在檢測條件下測定熒光強度值。以溶液濃度為橫坐標,最終熒光強度值( Y)為縱坐標,繪出其熒光標準曲線并求得工作曲線的回歸方程。
以上內容僅供大家參考,歡迎大家咨詢購買上海安亭科學儀器廠生產的離心機。