上海安亭科學儀器廠酶標板轉(zhuǎn)子型號有，LXJ-IIB低速大容量多管離心機，這款是非常常賣的一款設備，容量大，最大可離心500mlx6，主要還能配備酶標板轉(zhuǎn)子，96孔的，文中介紹一種酶標板轉(zhuǎn)子低速離心細胞制片的方法。
摘要：常規(guī)培養(yǎng)懸浮細胞，離心收集細胞后，通過載玻片直接涂片、細胞涂片離心機和酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機 3 種方法制備細胞涂片，經(jīng)瑞氏 - 姬姆薩染色后，顯微鏡下觀察拍照。發(fā)現(xiàn)直接涂片中細胞圖像難以觀察，效果差，而細胞涂片離心機和酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機制備的細胞涂片，細胞圖像清晰，均可達到細胞制片要求。 酶標板轉(zhuǎn)子低速離心細胞制片是一種便捷的新方法,下圖為上海安亭LXJ-IIB低速大容量多管離心機介紹：
關(guān)鍵詞：酶標板轉(zhuǎn)子、上海安亭離心機、細胞制片
將液體樣本均勻地涂布在載玻片上， 形成可以在顯微鏡下直接觀察細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化的細胞涂片，是常用的生物醫(yī)學實驗手段。從機體組織或培養(yǎng)的細胞到肉眼觀察成像， 整個操作過程需要良好的技術(shù)和豐富的經(jīng)驗。 如果細胞涂片需要長期保存或其他進一步操作如細胞染色等， 干燥固定是必不可少的處理措施， 雖然已有商品化的專用細胞涂片離心機， 但此技術(shù)在設備和方法上仍然存在著發(fā)展空間。 上海安亭LXJ-IIB低速大容量多管離心機可以直接制備細胞涂片，貼壁培養(yǎng)大腸癌細胞株細胞經(jīng)離心機制片，保持了細胞貼壁生長的原來形狀 。
1、材料和方法
1.1、材料：白血病T淋巴細胞株為本實驗室保存，小牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）、 RPMI1640培養(yǎng)液（杭州吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司）、載玻片（江蘇飛舟玻塑有限公司帆船牌）、瑞氏 - 姬姆薩染色液；細胞涂片離心機（美國 cytospin ），LXJ-IIB酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機（上海安亭科學儀器廠）。
1.2、方法
1.2.1、細胞培養(yǎng)細胞株培養(yǎng)于含10％小牛血清的RPMI1640（ 加100 U/mL青霉素 、100U/mL鏈霉素）細胞培養(yǎng)基中，換液培養(yǎng)瓶中約一半液體傳代，加入相近量的細胞培養(yǎng)基，置于細胞培養(yǎng)箱中，待細胞培養(yǎng)室呈對數(shù)生長時備用。
1.2.2、細胞涂片制備與染色收集上述細胞 ，置于上海安亭離心機中800r/min離心5min，去上清液，加入PBS洗滌 1次，然后調(diào)整細胞濃度為1×106mL ，分別取等量的細胞進行3種方法制片。 直接涂片法，取20μL細胞懸液均勻涂布載玻片，然后置于室溫干燥；細胞涂片離心機法取等量的細胞，然后加200μL的PBS稀釋，安裝好載玻片加樣置于上海安亭離心機中500r/min離心3min ；酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機法，先用透明膠帶固定載玻片上下端在酶標板上， 然后取20μL細胞懸液均勻涂布載玻片， 立即置于上海安亭科學儀器廠離心機中酶標板轉(zhuǎn)子上500 r/min離心3min 。 離心后取出載玻片置于室溫干燥，均加數(shù)滴甲醇固定，任其揮發(fā)干燥，然后瑞氏 - 姬姆薩染色，干燥后顯微鏡下觀察，CCD拍照。
2、結(jié)果
3 種方法制備的細胞涂片， 直接涂片法中制備的細胞涂片（A）細胞固縮，面積變小，染色深沉，細胞質(zhì)核界限不清，難以看清細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，整個圖像效果差，達不到細胞制片要求。而用上海安亭科學儀器廠生產(chǎn)的細胞涂片離心機和酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機制備的細胞涂片（B\C）細胞均保持培養(yǎng)體系中原來大小，細胞核、質(zhì)界限分明，細胞質(zhì)藍色，細胞核深紫，也可見分裂相細胞，整個圖片清晰，經(jīng)超過5張以上的細胞制片顯微鏡下觀察，圖像B\C均優(yōu)于A，符合細胞制片要求，且 B 、 C 細胞染色效果沒有差異。第3種方法因直接涂片離心， 不需要過多的前期準備及后期配件清洗，操作過程更為便捷。
現(xiàn)有的細胞涂片技術(shù)， 較簡單的方法是直接涂布于載玻片上， 復雜方法需使用專用細胞涂片離心機，首先將載玻片置于該設備玻片匣里，墊一張自制帶孔載玻片大小的濾紙， 扣牢放入上海安亭離心機轉(zhuǎn)盤中，將處理好的細胞加入進樣孔，以一定速度離心，取出載玻片，最后清洗設備玻片匣備用。 直接涂布制片后染色，如圖 1A 細胞變形、縮小，效果差。 細胞涂片離心機制片效果好 ，細胞保持原狀，染色效果理想，符合生物醫(yī)學制片要求，與培養(yǎng)體系中理想細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持一致。 并且此法僅僅是將載玻片用透明膠帶固定在酶標板上， 在原有的酶標板轉(zhuǎn)子低速離心機中離心而已，離心機是生物學教學、科研領(lǐng)域中常見的儀器 ，并沒有增加設備和耗材。 而且整個過程不需要太多的前期準備工作和后期的清洗負擔，也可用于其他來源的組織體液樣本，尤其適合高校教學，培養(yǎng)大學生實踐創(chuàng)新能力。此方法要求操作迅速， 不同樣本的離心速度和時間也不盡相同。 總之，以保留細胞、快速干燥細胞外而不損失細胞內(nèi)水分為準則。
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