TDL-5000bR臺式冷凍離心機可對軟骨細胞的體外分離，文中先，介紹軟骨細胞的體外分離與培養所需要用到的儀器和試劑，在簡單介紹上海安亭TDL-5000bR臺式冷凍離心機對細胞的體外分離的具體操作方法。
1、材料和方法
上海安亭科學儀器廠首先介紹材料之實驗試劑與儀器：
(1)、實驗設備：倒置相差顯微鏡(日本Olympus公司)；5%CO2孵育箱(美國Thermo Fisher公司)；VCX 130PB型超聲波破碎儀(美國Sonics公司)；EPOCH TAKE 3微量孔板分光光度計(美國BioTek公司)；TDL-5000bR通用臺式冷凍離心機(上海安亭科學儀器廠)。
(2)、實驗試劑：α-MEM培養基(美國Gibco公司，規格500mL，貨號12571063)；PBS緩沖液(美國Corning公司，規格500mL，貨號21-040-CVR)；Ⅱ型膠原酶(美國Gibco公司，規格1g，貨號17101015)；HBSS緩沖液(美國Gibco公司，規格500mL，貨號17101015)；胎牛血清(美國Gibco公司，規格500mL，貨號10099141)；二甲基亞砜(美國Sigma公司，規格100mL，貨號D2650)；BCA蛋白定量試劑盒(中國聯科生物公司，號A81911125)；PVDF膜(美國Millipore公司，0.45μm，貨號R8HA7852)；蛋白酶抑制劑(美國Roche公司，貨號04693116001)；脫脂奶粉(中國Easybio公司，貨號BE6250)；GAPDH單克隆抗體(美國Abcam公司，規格100μL，貨號ab8245)；Col2a多克隆抗體(美國Abcam公司，規格100μg，貨號ab34712)；MMP-13多克隆抗體 ( 美國Abcam公司，規格100μg ，貨號ab39012)；Aggrecan單克隆抗體(美國Abcam公司，規格1mL，貨號ab3778)。
2、上海安亭科學儀器廠介紹利用TDL-5000bR臺式冷凍離心機對細胞的體外分離實驗方法：
人骨關節炎軟骨組織的取材：于全膝關節置換術中取下廢棄的軟骨組織標本，立刻低溫無菌保存，30min內轉移至實驗室超凈工作臺內。使用11號刀片(帶柄)小心刮除關節周圍附著的組織，PBS織液，15號刀片(帶柄)逐層削取關節軟骨片，注意避開脛骨平臺周圍骨質增生部分及其表面的纖維軟骨，PBS漂洗3次，將組織移入含少量培養基的小瓶內，無菌眼科剪將組織粉碎為1mm3以下的組織塊。
軟骨細胞的分離、培養與傳代：將組織塊移入10cm培養皿中，分別加入10倍體積含0.2%Ⅱ型膠原酶的α-MEM培養液與2倍體積的HBSS緩沖液，置于37℃孵育箱中消化，一般消化4-6h；然后將含有組織塊的液體移入上海安亭科學儀器廠的15mL離心管中，置于上海安亭TDL-5000bR臺式冷凍離心機中設置1200r/min離心5min，棄去上清液，加入含體積分數為15%胎牛血清的α-MEM培養液終止消化。所得組織與細胞沉淀經吹打混勻后種入25cm2培養瓶中，置于37℃恒溫、體積分數為5%CO2、飽和濕度培養箱內培養，每48h更換培養液1次。
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